大鼠CD4~+CD25~+T调节细胞的分离培养及其功能分析

作者：吕凌; 张峰; 王学浩; 浦立勇; 姚爱华; 俞悦

来源：细胞与分子免疫学杂志, 2006, 22(04): 417-419.

DOI：10.3321/j.issn:1007-8738.2006.04.002

• CD4+CD25+T调节细胞
• Foxp3
• 免疫抑制

目的:研究大鼠CD4+CD25+T调节细胞(Tr)的分离培养,并对其功能进行初步分析。方法:无菌条件下切取大鼠脾脏分离脾淋巴细胞。用免疫磁珠细胞分离系统(MACS)分选CD4+CD25+T细胞,并以流式细胞术检测其纯度后,对其进行扩增。采用混合淋巴细胞反应研究CD4+CD25+Tr细胞对CD4+CD25-T细胞的免疫抑制作用。用ELISA法检测培养上清中IL-2、IFN-γ及IL-10水平的差异。结果:MACS分离的CD4+CD25+T细胞的纯度达86%~93%。该细胞与CD4+CD25-T细胞相比能特异性地表达Foxp3基因。体外培养中能明显抑制效应T细胞增殖及其分泌IFN-γ、IL-2,但其自身能分泌Th2型细胞因子IL-10。结论:采用MACS系统阴性加阳性分选,可高效快速的获得理想纯度和免疫抑制功能的大鼠CD4+CD25+T调节细胞,该细胞对CD4+CD25-T细胞具有明显的免疫抑制作用,并能特异性的表达Foxp3基因。

• 出版日期2006
• 单位南京医科大学第一附属医院