幽门螺杆菌重组vacA-ctxB蛋白的基因克隆与表达

作者：张任飞; 杨致邦; 栗俊杰; 夏丽君; 李昌庆; 陈瀑

来源：中国微生态学杂志, 2008, (06): 562-565.

• 幽门螺杆菌
• 细胞空泡毒素
• 霍乱毒素B亚单位
• 融合蛋白
• 表达 Helicobacter pylori
• Vacuolating cytotoxin antigen A
• Cholera toxin subunit B
• Fusion protein
• Expression

目的构建幽门螺杆菌(H.pylori)vacA毒性片段与霍乱毒素B亚单位(ctxB)基因的原核表达载体,并诱导表达VCTB重组蛋白,为制备防治H.pylori感染的口服疫苗奠定基础。方法以H.pylori基因组DNA为模板,PCR扩增vacA毒性片段基因,克隆至质粒pQE30中,获得重组质粒pQE30-vacA。再以pET32(a)+-ctxB质粒为模板PCR扩增ctxB目的基因并插入pQE30-vacA中,构建含双基因的表达质粒pQE-vctB。克隆至大肠埃希菌Top10,并在DH5α中诱导表达。SDS-PAGE分析表达结果,Ni-NTA柱纯化后Western blot鉴定其抗原性,免疫家兔...

• 出版日期2008
• 单位核工业四一六医院; 重庆医科大学附属第一医院; 成都市第六人民医院; 重庆医科大学