多重PCR技术快速检测烤后烟叶转基因成分

作者：余婧; 郭玉双; 林世锋; 余世洲; 赵杰宏

来源：生物技术通报, 2015, 31(07): 64-68.

DOI：10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2015.07.010

• 多重PCR
• 烤后烟叶
• 转基因成分 multiplex PCR
• flue-cured tobacco
• GMO ingredient

为提高烟叶转基因成分检测效率,建立了烤后烟叶中3种外源基因成分的多重PCR检测技术体系,通过优化该反应体系中的Mg2+、d NTP、r Taq酶、引物浓度及退火温度等参数,实验最适条件为将4对相等摩尔浓度引物预先按1∶1∶1∶1(V/V)混合,在Mg2+为1.5 mmol/L、d NTP为125μmol/L、r Taq酶1 U、混合引物1μmol/L,DNA 100 ng,退火温度65℃,循环数35个的反应条件下,在一次PCR反应中便可同时检测烟草内源基因NR,外源基因35S启动子、NOS终止子、NPT II筛选标记基因。优化后的反应体系能够有效地检测出转基因烤后烟叶百分比含量为0.9%(V/...

• 出版日期2015
• 单位贵州省烟草科学研究院