K562细胞TMS1基因甲基化状态及三氧化二砷对其去甲基化作用

作者：李洪丽; 董小锋; 王焱; 徐文伟; 董琳; 毕可红; 朱传升

来源：中华血液学杂志, 2014, 35(03): 197-201.

DOI：10.3760/cma.j.issn.0253-2727.2014.03.004

• K562细胞
• 基因,TMS1
• DNA甲基化
• 细胞凋亡
• 砷剂

目的探讨慢性髓性白血病细胞系K562细胞甲基化诱导静止基因(TMS1)甲基化程度及三氧化二砷(As2O3)对其甲基化状态的逆转作用及其机制。方法 K562细胞经不同浓度As2O3处理48 h,采用甲基化特异性PCR(MSP)法检测As2O3处理前后K562细胞TMS1基因甲基化程度;RT-PCR及Western blot法检测As2O3处理前后K562细胞TMS1 mRNA及蛋白表达,Western blot法检测凋亡蛋白Bcl-2、Bax表达水平的变化;用细胞凋亡检测试剂盒(Annexin V/PI)标记、流式细胞术检测细胞凋亡。结果 K562细胞TMS1基因呈完全甲基化,TMS1 mRNA及蛋白呈低表达状态,相对表达水平分别为0.01±0.01、0.09±0.02;2μmol/L As2O3可完全逆转K562细胞TMS1的甲基化水平,TMS1 mRNA及蛋白相对表达水平分别为0.72±0.04和1.3±0.06,与处理前相比明显升高(P<0.01);细胞凋亡检测结果显示,与对照组相比,2μmol/L As2O3处理组细胞凋亡率明显增加[(2.05±0.16)%对(12.24±1.06)%,P<0.05)]。与对照组相比,2μmol/L As2O3处理组K562细胞抗凋亡蛋白Bcl-2表达降低,促凋亡蛋白Bax表达明显增高,Bcl-2/Bax比值明显降低(1.94±0.14对0.56±0.12,P<0.01)。结论 As2O3可通过逆转抑癌基因TMS1的甲基化状态,恢复其表达,并通过下调Bcl-2/Bax比值促进K562细胞凋亡。

• 出版日期2014
• 单位山东大学; 山东省千佛山医院