幽门螺杆菌尿素膜通道基因的克隆和表达

作者：王保宁; 施桥发; 李虹; 李明远; 陈翠萍; 郑庆文; 蒋忠华; 肖丽英

来源：南方医科大学学报, 2007, (01): 24-27.

• 幽门螺杆菌
• 尿素膜通道基因
• 克隆
• 基因表达
• 免疫特性 Helicobacter pylori
• the urea membrane channel gene
• cloning
• gene expression
• immunological characteristics

目的克隆幽门螺杆菌(Hp)尿素膜通道基因(ureI)和构建能表达UreI蛋白的原核表达工程菌,并初步研究产物的表达特性和免疫特性。方法用PCR方法从Hp基因组中克隆ureI基因,构建原核表达重组质粒pET32a/ureI,双酶切和测序鉴定正确后,重组质粒转染大肠杆菌BL21+(DE3),构建高效表达UreI的工程菌BL21+/UreI。不同温度条件下用1.0mmol/LIPTG诱导重组蛋白表达,用SDS-PAGE和Gel-ProAnalyzer4分析重组蛋白的表达,并用Westernblotting对其免疫原性进行分析。结果克隆到约650bp的基因片段,测序结果与GENBANK中对应菌株的ur...

• 出版日期2007
• 单位中国药品生物制品检定所; 四川大学; 生物治疗国家重点实验室; 兰州生物制品研究所