茄病镰刀菌对人角膜上皮细胞NOD2表达及相关炎症因子分泌水平的影响

作者：李豪亮; 朱然; 张希熹; 陆志峰; 钱晶晶; 梁舒^*

来源：眼科新进展, 2021, 41(07): 633-637.

DOI：10.13389/j.cnki.rao.2021.0130

• 茄病镰刀菌
• 炎症因子
• 人角膜上皮细胞
• NOD2

目的探讨茄病镰刀菌对人角膜上皮细胞(hCEC)中NOD2表达及下游炎症因子分泌水平的影响。方法将对数生长期的hCEC分为对照组(无真菌刺激)、真菌刺激组(根据加入真菌浓度不同分为103、104、105、106 CFU·mL-1刺激组),真菌刺激组分别刺激hCEC 4 h、8 h、12 h、16 h, RT-qPCR检测各组hCEC中NOD2 mRNA表达;105CFU·mL-1茄病镰刀菌孢子刺激12 h、24 h、36 h, Western blot检测各组hCEC中NOD2蛋白表达;细胞免疫荧光法检测NOD2分子定位和表达;103、104、105、106 CFU·mL-1茄病镰刀菌孢子刺激hCEC 36 h, ELISA法检测各组hCEC培养上清液中炎症因子白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)蛋白含量。结果随着茄病镰刀菌孢子刺激浓度的升高和刺激时间的延长,hCEC中NOD2 mRNA表达逐渐升高,105 CFU·mL-1茄病镰刀菌孢子刺激8 h, hCEC中NOD2 mRNA相对表达水平达到峰值,差异有统计学意义(P<0.05);105 CFU·mL-1茄病镰刀菌孢子刺激hCEC 12 h、24 h、36 h, hCEC中NOD2蛋白相对表达水平逐渐增多,与对照组相比差异均有统计学意义(均为P<0.05);105 CFU·mL-1茄病镰刀菌孢子刺激24 h后,NOD2主要表达在hCEC细胞质中,其荧光分子表达强度显著增加。随着茄病镰刀菌孢子刺激浓度的增加,hCEC中相关炎症因子的分泌水平增加,104、105、106 CFU·mL-1茄病镰刀菌孢子刺激hCEC 36 h, IL-6、IL-8、TNF-α蛋白含量与对照组相比,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论茄病镰刀菌孢子刺激可上调hCEC中NOD2表达并促进相关炎症因子分泌,NOD2参与了hCEC抗茄病镰刀菌的固有免疫反应。

• 出版日期2021
• 单位南通大学附属医院