高表达人源Her2乳腺癌小鼠模型的建立及鉴定

作者:李明娟; 蒋小红; 高广春; 闵锐; 黄嬛
来源:第二军医大学学报, 2017, 38(04): 488-492.
DOI:10.16781/j.0258-879x.2017.04.0488

摘要

目的构建并鉴定高表达人源Her2乳腺癌转基因小鼠模型。方法构建pMD18T-MMTV-huHER2-EGFP转基因构件,通过原核显微注射方法将线性化、纯化后的外源质粒pMD18T-MMTV-huHER2-EGFP注射入C57BL/6J小鼠受精卵中,胚胎移植至同期发情的假孕受体母鼠输卵管内,获得子代小鼠。采用PCR鉴定子代小鼠尾部组织基因组DNA,用蛋白质免疫印迹法检测乳腺组织Her2蛋白的表达,通过组织病理学切片观察转基因小鼠乳腺组织的病理学变化。结果经PCR方法检测得到转基因阳性小鼠。蛋白质免疫印迹结果显示,与野生型小鼠相比,F2代阳性小鼠的乳腺组织中Her2蛋白高表达。病理组织切片表明25周龄阳性小鼠的乳腺组织已经出现明显的癌变倾向。结论高表达人源Her2乳腺癌小鼠模型成功建立并能稳定遗传,可自发形成乳腺癌,其生物学特性和病理学改变与人乳腺癌相近,可作为研究乳腺癌发生发展的动物模型。

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