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摘要
目的纯化原核系统中表达的A组轮状病毒VP7基因,建立间接ELISA方法,为进一步大量表达VP7基因,构建基因工程疫苗和建立快速临床检测奠定基础。方法反转录并扩增VP7基因,连接到载体中,转换乳酸杆菌,诱导并纯化重组蛋白。将纯化蛋白免疫家兔制备抗血清,并建立间接ELISA方法。结果成功获得VP7基因的扩增片段,筛选阳性克隆,得到大小为28 kD的大量表达蛋白。确定了间接ELISA法的最佳反应条件和工作浓度。结论构建的重组乳酸杆菌能够大量表达VP7蛋白,纯化的VP7蛋白有很好的免疫原性,制备的抗血清用于ELISA方法能够得到准确的检测结果。
- 出版日期2010
- 单位吉林大学
