抗VASN-EGFFN3重组蛋白的单克隆抗体的制备

作者：莫婉灵; 李辉; 廖舟翔; 温莎; 黄雪静; 张起; 宋振宇; 杨丽超^*; 何敏^*

来源：广西医科大学学报, 2023, 40(04): 690-696.

DOI：10.16190/j.cnki.45-1211/r.2023.04.025

• VASN
• 单克隆抗体
• 重组蛋白

目的：通过大肠杆菌表达系统表达和纯化VASN-EGFFN3重组蛋白，免疫小鼠制备抗VASN-EGFFN3单克隆抗体。方法：构建pET30a(+)-VASN-EGFFN3重组载体，以大肠杆菌BL21(DE3)为载体表达VASN-EGFFN3重组蛋白。用镍离子亲和层析柱纯化VASN-EGFFN3重组蛋白。利用纯化后的VASN-EGFFN3重组蛋白免疫BALB/c小鼠后，用杂交瘤技术制备抗VASN-EGFFN3单克隆抗体。结果：成功构建pET30a(+)-VASN-EGFFN3重组原核表达质粒，诱导的重组VASN-EGFFN3蛋白主要以包涵体的形式存在。纯化蛋白免疫BALB/c小鼠后获得的血清抗体效价达到1∶2 187 000，免疫效果良好。利用杂交瘤技术获得2株杂交瘤细胞株。结论：成功利用大肠杆菌表达系统制备并纯化VASN-EGFFN3重组蛋白，通过杂交瘤技术成功制备小鼠抗VASN-EGFFN3单抗。

• 出版日期2023
• 单位公共卫生学院; 广西医科大学