大鼠NKx6.1启动子克隆及特异性表达分析

作者：王大玮; 汪蓓蕾; 姚远; 陈皓; 张欣; 郭刚; 张瑞

来源：生物技术通报, 2016, (08): 113-116.

DOI：10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2016.08.017

• 同源盒基因NKx6.1
• 甲状腺激素
• 双荧光素酶报告检测
• 启动子活性 homeobox gene Nkx6.1
• thyroid hormones
• dual-luciferase reporter assay system
• promoter activity

旨在构建大鼠NKx6.1启动子的报告载体,验证转录因子T3R对NKx6.1启动子的调控活性。用PCR扩增大鼠脑组织NKx6.1的5'上游启动子片段2.4 kb,应用生物信息学方法预测该片段上潜在的转录因子T3R结合位点,根据不同的结合位点作系列截短,获得3段长度不等的启动子缺失片段,分别克隆到荧光素酶报告基因表达质粒(p GL3-Basic)上,构建相应的报告载体。将报告载体和T3R共转染大鼠星形胶质细胞(rat astrocytes,RA),并检测报告基因荧光素酶的活性。结果显示,成功构建大鼠NKx6.1启动子报告载体,双荧光素酶报告基因活性检测表明T3R对NKx6.1启动子有明显调控作用,...

• 出版日期2016
• 单位天津医科大学代谢病医院