牛传染性鼻气管炎病毒gE基因SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测方法的建立

作者：孙志明; 周伟光; 陈玉惠; 高晶; 希尼尼根; 关平原

来源：内蒙古农业大学学报(自然科学版), 2012, (03): 5-8.

DOI：10.16853/j.cnki.1009-3575.2012.03.002

• 牛传染性鼻气管炎病毒
• 荧光定量PCR
• 灵敏性
• 特异性 Bovine Rhinotracheitis virus
• Real-time PCR
• sensitivity
• specificity

目的建立1种特异、灵敏、高效的检测IBRV gE基因的荧光定量PCR方法,并为鉴别IBRV野毒株和gE基因缺失疫苗株的感染提供技术手段。方法根据IBRV gE基因保守序列,设计一对引物,建立荧光定量PCR反应体系和反应条件,利用10倍梯度稀释病毒DNA进行荧光定量PCR扩增,以检测本试验建立的荧光定量PCR的灵敏度。用IBRV、牛病毒性腹泻病毒、牛轮状病毒、MDBK细胞、牛血清等进行特异性检测。用模拟样品进行临床应用试验。结果本试验建立的荧光定量PCR方法,其灵敏度约为70 DNA拷贝/μL,除了IBRV从其他病毒和样品未扩增出曲线,临床模拟样品检测结果为0.03TCID50。结论本试验建立的...

• 出版日期2012
• 单位内蒙古农业大学