敲低HSC-LX2人肝星状细胞钙网蛋白引起细胞内Ca2+水平升高并促进细胞凋亡

作者：戴琳玉; 王路广; 刘海英; 肖永红

来源：细胞与分子免疫学杂志, 2021, 37(06): 501-506.

DOI：10.13423/j.cnki.cjcmi.009237

• HSC-LX2人肝星状细胞
• 钙网蛋白(CALR)
• 小干扰RNA(siRNA)
• 细胞凋亡
• 2+" name="keyword">Ca2+

目的探讨沉默钙网蛋白(CALR)基因对人肝星状细胞(HSC-LX2)凋亡及细胞内Ca2+水平的影响。方法设计靶向CALR的小干扰RNA(siRNA),脂质体法转染至HSC-LX2细胞,筛选出敲低CALR的HSC-LX2细胞。采用异硫氰酸荧光素标记的膜联素Ⅴ/碘化丙啶(annexinⅤ-FITC/PI)双标记结合流式细胞术检测细胞凋亡,Fluo 3-AM钙离子荧光探针负载结合激光共聚焦显微镜观察细胞内Ca2+浓度变化,反转录PCR检测细胞CALR、B细胞淋巴瘤分子2(Bcl2)、Bcl2相关X蛋白(BAX)的mRNA水平,Western blot法检测CALR、BAX、Bcl2蛋白表达。结果敲低HSC-LX2细胞CALR后,细胞凋亡率显著增加,Ca2+浓度也有明显升高,BAX的表达显著增加,Bcl2表达明显降低,且BAX/Bcl2比值显著升高。结论敲低HSC-LX2细胞CALR的表达会增加细胞Ca2+水平,上调BAX/Bcl2的比值,促进细胞凋亡。

• 出版日期2021
• 单位公共卫生学院; 华北理工大学