H9亚型禽流感病毒血凝素单克隆抗体制备及鉴定

作者：邓显文; 谢芝勋; 谢志勤; 刘加波; 庞耀珊; 谢丽基; 范晴; 罗思思; 黄莉; 黄娇玲; 曾婷婷; 张艳芳

来源：南方农业学报, 2016, 47(04): 679-683.

• 禽流感病毒(AIV)
• H9亚型
• 血凝素
• 单克隆抗体
• HI效价
• 亚型广谱性

【目的】制备H9亚型禽流感病毒(AIV)血凝素(HA)单克隆抗体,为检测诊断AIV提供技术支持。【方法】以灭活H9亚型AIV广西分离株为免疫原,免疫68周BALB/c雌性小鼠,然后取其脾细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞进行细胞融合,经血凝抑制试验(HI)及间接免疫荧光试验(IFA)筛选H9亚型AIV血凝素单克隆抗体的杂交瘤细胞。【结果】经过4次亚克隆,获得3株稳定的H9单克隆抗体杂交瘤细胞株,分别命名为8A4、1B11和7F1细胞株,其细胞株培养上清液HI效价为27210,腹水HI效价为216219;单克隆抗体亚类鉴定结果表明,3株H9单克隆抗体均属于Ig G1亚类,其轻链均为K链。3株H9单克隆抗体只与H9亚型AIV发生特异性HI反应,而与其他HA亚型AIV及新城疫病毒(NDV)、减蛋综合症病毒(EDS)、传染性支气管炎病毒(IBV)无交叉反应。3株H9单克隆抗体细胞株的抗体分泌能力稳定性良好。【结论】用灭活H9亚型AIV为免疫原能成功制备针对H9亚型AIV血凝素的单克隆抗体,且具有良好的亚型广谱性和特异性。

• 出版日期2016
• 单位广西壮族自治区兽医研究所