摘要

目的采用开放式压力控制培养系统,研究压力对人眼小梁细胞(HTMCs)超微结构及纤维连接蛋白(FN)合成的影响。方法组织块法体外培养HTMCs,选取第5代细胞分为实验组和对照组。对照组不施加压力,实验组采用开放式压力控制培养系统分别施加20、40、608、0 mmHg(1 mmHg=0.133 kPa)的压力,压力作用时间分别为12、24、36 h。在光学显微镜、透射电镜下观察HTMCs形态及超微结构的变化。采用免疫组化方法和图像分析法检测FN的表达变化。结果透射电镜显示:20 mmHg压力作用12、24、36 h后与对照组比较,HTMCs超微结构未见明显改变;40mmHg压力作用12、24、36 h后HTMCs胞质内出现大小不等的空泡;60、80 mmHg压力作用12、24、36 h后,HTMCs出现线粒体嵴变得短而少或者丧失、溶酶体髓样结构增多等不可逆性改变。免疫组化结果显示体外培养的HTMCs均阳性表达FN;图像分析显示:20 mmHg压力作用12、24、36 h后HTMCs合成FN与对照组比较差异均无显著性意义(均P>0.05);40 mmHg压力作用12、24、36 h后HTMCs合成FN明显增加,差异均有显著性意义(均P<0.01);而60、80 mmHg压力作用12、243、6 h后HTMCs合成FN则逐渐下降(均P<0.01),但与对照组比较仍有不同程度增高(均P<0.01)。结论环境压力升高可以引起小梁细胞形态、超微结构以及FN的表达发生变化,从而可能在原发性开角型青光眼的发生和发展过程中发挥重要作用。

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