DSB修复基因hKu70反义RNA真核表达载体构建

作者：刘起展; 庄志雄; 江高峰; 何云; 杜柳涛

来源：毒理学杂志, 2002, 16(04): 197-199.

DOI：10.3969/j.issn.1002-3127.2002.04.001

• DNA双链断裂
• hKu70
• 逆转录酶-多聚酶链式反应
• 修复基因
• 真核表达载体
• 反义RNA DNA double\|strand break
• hKu 70
• Reverse transcriptase\|polymerase chain reaction
• Repair gene
• Eukaryotic expression vector
• Antisense RNA

目的　构建人DNA双链断裂 (DSB)修复基因hKu70反义RNA真核表达载体pEGFP C1 K ,为以后的hKu70基因功能和毒理学研究提供实验材料。方法　提取人胚肺成纤维细胞 (HLF)总RNA ,逆转录酶 多聚酶链式反应 (RT PCR)扩增hKu70基因cDNA保守序列 ,经与pGEM T载体连接、筛选、克隆、抽提质粒和双酶切后 ,将纯化的hKu70基因cDNA保守序列反向插入绿色荧光蛋白表达载体pEGFP C1中 ,筛选、克隆、抽提质粒 ,从而构建hKu70基因反义RNA真核表达载体pEGFP C1 K。结果　经RT PCR获得 467bp含限制性内切酶位点的DNA片段 ,T载体...

• 出版日期2002
• 单位中山大学公共卫生学院; 深圳市疾病预防控制中心