猪繁殖与呼吸综合征RT-LAMP检测方法的建立和初步应用

作者:孙凤萍; 高骏; 刘成倩; 李红; 易建中; 姚惠娟
来源:上海畜牧兽医通讯, 2018, (01): 2-5.
DOI:10.14170/j.cnki.cn31-1278/s.2018.01.001

摘要

根据Genbank上已报道的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)基因组序列设计了2对LAMP引物(P-F3/P-B3、P-FIP/P-BIP),通过反转录-环介导等温扩增技术(RT-LAMP)反应条件的优化,建立了猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)RT-LAMP检测方法,并通过酶切的方法对阳性结果进行了验证。本方法最低可以检测到反应体系内1pg的PRRSV的RNA,表明本方法具有较高的检测灵敏度;通过在反应中加入SYBR-Green I荧光染料后可以方便地用肉眼对试验结果进行可视化判定。所以,本研究建立的PRRSV的RT-LAMP检测方法能够满足基层临床PRRSV病原的快速检测要求。

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