不同校正和定位方法在常春藤一测多评中的应用

作者：何兵; 梁思成; 田吉; 杨世艳^*

来源：药物分析杂志, 2023, 43(07): 1135-1147.

DOI：10.16155/j.0254-1793.2023.07.06

• 高效液相色谱
• 一测多评
• 常春藤
• 绿原酸
• 芦丁
• 烟花苷
• 常春藤皂苷
• 斜率校正
• 多点校正
• 单点校正
• 两点校正
• 相对保留时间

目的:建立一测多评(QAMS)的方法同时测定常春藤中8个活性成分(新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、芦丁、烟花苷、常春藤皂苷C、常春藤皂苷B、α-常春藤皂苷)的含量。方法:采用高效液相色谱，Lubex Kromasil C18(250 mm×4.6 mm, 5μm)色谱柱，以乙腈-0.1%磷酸水溶液为流动相，梯度洗脱，检测波长326 nm(0～15 min,检测酚酸类)、266 nm(15～25 min,检测黄酮类)、210 nm(25～45 min,检测皂苷类),流速1.0 mL·min-1,柱温30℃,进样量10μL。以绿原酸为内参物，分别采用不同校正方式(斜率校正、多点校正和单点校正)计算其他成分相对于绿原酸的相对校正因子(RCF)。同时考察不同色谱系统、色谱柱、流动相梯度比例、水相磷酸比例、测定波长、流速、柱温对相对校正因子的影响。考察不同定位方式[相对保留时间(RRT)、两点校正(TPC)]对待测成分色谱峰定位的影响。以相对误差考察一测多评法与外标法(ESM)和标准曲线法(SCM)结果之间的差异，并评估一测多评的准确性和可行性。结果:采用斜率校正，新绿原酸、隐绿原酸、芦丁、烟花苷、常春藤皂苷C、常春藤皂苷B、α-常春藤皂苷相对于绿原酸的RCF分别为0.980、1.019、0.653、0.708、0.062、0.064、0.117;采用多点校正，上述成分的RCF分别为0.975、1.006、0.645、0.711、0.060、0.061、0.114;采用单点校正，上述成分的RCF分别为0.952、0.992、0.631、0.704、0.061、0.063、0.112。不同试验条件下RCF重复性良好(RSD<3%)。相对保留时间和两点校正单一应用均无法实现色谱峰的准确定位，但二者结合可实现色谱峰的精准定位(RE<3%)。一测多评法(单点校正)测得10批常春藤中8个成分含量分别为新绿原酸0.101～0.495 mg·g-1、绿原酸1.134～4.855 mg·g-1、隐绿原酸0.064～0.348 mg·g-1、芦丁1.054～4.558 mg·g-1、烟花苷0.452～1.331 mg·g-1、常春藤皂苷C 11.121～72.350 mg·g-1、常春藤皂苷B 4.944～14.100 mg·g-1、α-常春藤皂苷5.325～19.734 mg·g-1,与外标法测定结果完全一致(RE=0%)。采用斜率校正和多点校正的测定结果与外标法和标准曲线法接近(RE<5%)。结论:所建一测多评法简便快捷、准确可靠，可用于常春藤中新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、芦丁、烟花苷、常春藤皂苷C、常春藤皂苷B、α-常春藤皂苷8个活性成分的同时测定。

• 出版日期2023
• 单位西南医科大学