禽呼肠孤病毒σC基因在杆状病毒表达系统中的表达及其活性鉴定

作者：孙美玉; 秦立廷; 高玉龙; 祁小乐; 高宏雷; 王永强; 王笑梅

来源：病毒学报, 2011, (04): 353-357.

DOI：10.13242/j.cnki.bingduxuebao.002190

• 禽呼肠孤病毒
• σC基因
• sf9细胞
• 杆状病毒 Avian Reovirus(ARV)
• σC gene
• sf9 cells
• baculoviruses

本研究利用Bac-To-Bac杆状病毒表达系统构建重组禽呼肠孤病毒(Avian reovirus,ARV)σC基因的杆状病毒,感染sf9细胞获得表达重组蛋白。首先,将ARVσC基因克隆至pFastBacHTA载体,构建重组供体载体pFσC,将其转化大肠杆菌DHl0Bac感受态细胞,使σC基因整合到Bacmid穿梭载体中,获得重组穿梭载体BacmidσC。通过脂质体介导将其转染到sf9昆虫细胞中,获得重组杆状病毒rBacσC。通过Western Blot、间接免疫荧光试验(IFA)进行检测,结果显示:σC蛋白在重组杆状病毒rBacσC感染的sf9昆虫细胞中获得正确表达,分子质量约为37kD,表达...

• 出版日期2011
• 单位兽医生物技术国家重点实验室; 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所