DPC4RNAi慢病毒载体的构建及其基因沉默效应

作者：仲丽丽; 白云; 张英博; 李洋; 潘思文; 刘宏; 周忠光

来源：辽宁中医药大学学报, 2014, (02): 63-66.

DOI：10.13194/j.issn.1673-842x.2014.02.022

• DPC4
• RNA干扰
• 慢病毒
• 基因沉默 DPC4
• RNA interference
• lentivirus
• gene silencing

目的 :构建DPC4基因RNA干扰慢病毒载体及其基因沉默效应。方法 :针对DPC4基因序列,利用网站设计程序按照RNA干扰序列设计原则,设计多个RNA干扰靶点序列,根据设计经验和设计软件进行评估测定,选择最佳的动力学参数靶点进入后续实验流程;生工生物合成含干扰序列的双链DNA oligo,其两端含酶切位点粘端,直接连入酶切后的RNA干扰载体上。将连接好的产物转入制备好的细菌感受态细胞,对长出的克隆进行酶切鉴定,挑选出阳性克隆测序,进行测序比对后,鉴定阳性克隆即为构建成功的目的基因RNA干扰慢病毒载体。结果:经过Western blot方法检测和测序证实,成功构建了DPC4 shRNA慢病毒载体...

• 出版日期2014
• 单位黑龙江中医药大学; 齐齐哈尔医学院