大片吸虫硫氧还蛋白过氧化物酶基因的原核表达及免疫原性分析

作者：鲍玉芳; 李伍杰; 王华俊; 石云良; 王俊宁; 黄维义

来源：动物医学进展, 2012, (06): 11-14.

DOI：10.16437/j.cnki.1007-5038.2012.06.019

• 大片吸虫
• 硫氧还蛋白过氧化物酶
• 基因表达
• 抗原性 Fasciola gigantica
• thioredoxin peroxidase
• gene expression
• antigenicity

构建大片吸虫硫氧还蛋白过氧化物酶(Fg.TPx)原核表达质粒,经大肠埃希菌Rosetta表达融合蛋白(Fg.TPx/His)并对其进行纯化和初步鉴定。PCR扩增Fg.TPx的基因片段,亚克隆至pET32a(+)中构建重组表达载体pPET32a-Fg.TPx。IPTG诱导表达,经镍离子亲和层析分离纯化后,进行SDS-PAGE和Western blot分析。重组质粒经限制性内切酶双酶切和测序分析表明构建成功,表达产物以可溶性和包涵体形式存在,纯度为90%,Wsetern blot证实该蛋白可与抗His单克隆抗体发生特异性结合反应,分子质量为TPx和His分子质量之和,表明是融合蛋白。重组蛋白可以被...

• 出版日期2012
• 单位广西大学