胆固醇氧化酶基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

作者：银国利; 张锐; 郭三堆; 陈毓荃; 牛天贵

来源：西北农业学报, 2003, (03): 12-16+35.

• 胆固醇氧化酶
• 基因克隆
• choEW
• 基因表达 Cholesterol oxidase
• Gene cloning
• choEW
• Gene expression

采用PCR方法从来源于蒙古野驴的马红球菌(Rhodococcus equi)4-2G2菌株中分离出编码胆固醇氧化酶的新基因(choEW),其与已知的胆固醇氧化酶基因choE和choB同源性均达99％;按其推断的氨基酸序列与choE和choB相比在485位缺少一个氨基酸,分析认为choEW与choB和choE属于同一基因家族。将choEW插入到原核表达载体pET-His中,构建出重组质粒pETW,并转化Escherichia coli BL21(DE3)plysS获得工程菌。经IPTG诱导后表达出分子量约为56 kD的蛋白质,与核苷酸序列推断的蛋白大小相符。目的蛋白表达量约占细胞总蛋白的11.9...

• 出版日期2003
• 单位中国农业科学院生物技术研究所; 中国农业大学; 西北农林科技大学