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摘要
构建了肠炎沙门菌参考株SE50336的SEF14主要亚单位编码基因sefA的缺失株SE50336ΔsefA,进一步探究野生株及SEF14菌毛缺失株的生物学功能。以SE50336为模板,利用λ-red同源重组技术构建sefA缺失株,通过绘制生长曲线、生物被膜测定试验、刚果红-考马斯亮蓝无盐培养基菌落表型试验、RT-qPCR、人结肠腺癌上皮细胞（Caco-2）的体外黏附测定来检测和比较两种菌株的生物学特性,并利用野生株和缺失株分别攻毒小鼠,探究SEF14菌毛对肠炎沙门菌致病力的影响。结果表明,野生株及缺失株生长情况无明显差异。与野生株相比,ΔsefA缺失株的生物被膜形成能力有所下降;菌落表型试验中野生株表现出典型的rdar（red,dry and rough）表型,而ΔsefA缺失株表现出saw（smooth and white）表型;RT-qPCR试验中,野生株的生物被膜形成主要关联基因csgA、bcsA、pgaC、fimA的转录量均显著高于ΔsefA缺失株,但缺失株与野生株对于Caco-2上皮细胞的黏附差异不显著（P=0.41）。小鼠体内致病性试验结果表明,野生株的LD50（10 CFU）显著低于缺失株（17.78 CFU）,表明SEF14亚单位编码基因sefA缺失株减弱了肠炎沙门菌对Balb/C小鼠的毒力。上述数据和试验结果为进一步研究SEF14菌毛的生物学功能及其致病性奠定了理论基础。
- 出版日期2021-5-25
- 单位扬州大学
