香烟烟雾提取物及尼古丁诱导甲状腺相关眼病患者眼眶成纤维细胞氧化应激反应并上调NF-κB表达

作者：王秋红; 曾程程; 牟旆; 高连娣; 沈亚; 魏锐利

来源：第二军医大学学报, 2016, 37(10): 1239-1244.

DOI：10.16781/j.0258-879x.2016.10.1239

• 吸烟
• 尼古丁
• 氧化性应激
• NF-κB
• 甲状腺相关眼病

目的探讨香烟烟雾提取物(CSE)及尼古丁对甲状腺相关眼病(TAO)氧化应激的影响,并以NF-κB为靶点探索其可能的分子机制。方法取5例无吸烟史的TAO患者和3例无吸烟史的因其他原因行眼外科手术的患者(对照患者)的眼外肌组织,原代培养眼外肌来源的眼眶成纤维细胞(OFs)。将OFs经10%CSE、0.5μg/mL尼古丁、10μg/mL尼古丁分别作用,即为CSE组、低浓度尼古丁组和高浓度尼古丁组。分别培养24、72h后分别采用MTT法、ELISA法和分光光度计法检测各组细胞活性、8-羟脱氧鸟苷(8-OHdG)水平及丙二醛(MDA)含量;24h后采用酶标仪法检测活性氧(ROS)水平,RTPCR法检测NF-κB mRNA水平。结果干预24及72h后,TAO患者及对照患者OFs的细胞活力在CSE作用下均下降(P<0.05),且TAO患者对OFs更敏感。高浓度尼古丁干预24h后,TAO患者OFs的8-OHdG水平增加(P<0.05);低浓度尼古丁干预72h时,OFs的8-OHdG水平也增加(P<0.05)。TAO患者及对照患者OFs经CSE或不同浓度尼古丁干预72h后的MDA含量均增加(P<0.01)。高浓度尼古丁干预24h后,TAO患者OFs中ROS水平上升(P<0.01)。CSE干预24h后,TAO患者OFs中NF-κB mRNA的表达上升(P<0.05);而对照患者OFs NF-κB mRNA的表达经CSE及高浓度尼古丁干预后下降(P<0.05)。结论吸烟可通过激活TAO患者OFs的氧化应激参与TAO的病理过程,即使吸烟量较少,经时间累积也可能发挥作用,其机制可能是通过上调NF-κB mRNA的表达来实现的。

• 出版日期2016
• 单位中国人民解放军第二军医大学; 长征医院