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摘要
目的 探讨双特异性磷酸酶2(DUSP2)对结直肠癌(CRC)细胞SW480的影响及其可能的机制。方法 利用癌症基因组图谱(TCGA)数据库分析DUSP2在CRC患者中的表达情况对预后的影响。通过对CRC细胞SW480转染慢病毒并用嘌呤霉素筛选构建出DUSP2稳定敲低的细胞株为实验组，以空载慢病毒转染并筛选后的SW480细胞为对照组。利用实时定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)技术及蛋白质印迹法检测DUSP2在mRNA水平及蛋白水平的表达。采用细胞划痕试验及细胞迁移试验评估SW480细胞迁移能力。采用CCK-8细胞增殖试验检测DUSP2敲低表达对SW480细胞增殖能力的影响。通过蛋白质印迹法检测丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路中ERK、p-ERK、p38、p-p38蛋白表达水平及多聚二磷酸腺苷-核糖聚合酶-1(PARP1)蛋白表达水平。结果 DUSP2基因表达水平与CRC患者的生存率无关(P>0.05)。蛋白质印迹法及qRT-PCR检测结果均显示DUSP2稳定敲低的SW480细胞(实验组)中DUSP2表达较对照组下调(P<0.05)。DUSP2稳定敲低的SW480细胞株构建成功。与对照组比较，实验组细胞划痕区域闭合速度较快，迁移能力较强，增长速度较快(P<0.05)。实验组细胞中p-ERK、p-p38及PARP1蛋白表达较对照组上调(P<0.05)。结论 敲低DUSP2的表达可显著增强SW480细胞的增殖及迁移并抑制其凋亡，这与DUSP2可促进ERK、p38的磷酸化有关。
- 出版日期2022
- 单位郑州大学第一附属医院
