菠萝凋萎相关病毒-3实时荧光定量PCR检测方法的建立

作者:胡加谊; 李向宏; 罗志文; 范鸿雁; 张治礼; 刘志昕; 何凡*
来源:果树学报, 2015, 32(01): 156-162.
DOI:10.13925/j.cnki.gsxb.20140127

摘要

【目的】建立菠萝凋萎相关病毒-3实时荧光定量PCR检测方法。【方法】根据PMWa V-3外壳蛋白基因的保守区域设计特异性引物和探针,通过优化PMWa V-3实时荧光定量PCR检测体系,构建以重组质粒为标准品的标准曲线,建立起PMWa V-3实时荧光定量PCR检测方法。【结果】该方法能特异性地检测PMWa V-3,且灵敏度是普通RTPCR的10倍;该方法重复性良好,组间和组内变异系数均小于1.73。【结论】建立的实时荧光定量PCR方法是一种快速、简便、可信度高的PMWa V-3定量检测方法。

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