不同方法转基因动物的外源基因甲基化分析(英文)

作者:刘莉; 林嘉鹏; 汪立芹; 吴阳升; 张利; 杨楠; 蒋香菊; 古丽米热; 黄俊成
来源:Agricultural Science & Technology, 2013, (02): 197-201+205.
DOI:10.16175/j.cnki.1009-4229.2013.02.032

摘要

[目的]检测不同克隆方法所获得的转基因绵羊的外源基因及其启动子的甲基化水平,以及蛋白表达的差异。[方法]通过体细胞克隆、干细胞克隆和卵周隙内注射法将外源基因增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,eGFP)和成纤维细胞内生长因子5(fibroblast growth factor5,FGF5)分别导入绵羊体内,获得转基因绵羊,以CMV为启动子,利用完全重亚硫酸盐沉淀测序法检测绵羊尾部组织外源基因启动子及编码区甲基化状态,Western blot检测外源基因的蛋白表达水平。[结果]启动子区的甲基化水平最高的是干细胞克隆,其次是体细胞克隆,卵周隙注...

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