科研之友
微信
新浪微博
Facebook
分享链接
摘要
目的：基于“正虚伏毒”理论，探讨金复康中有效的“扶正”和“蠲毒”组分黄芪甲苷Ⅳ联合重楼皂苷Ⅶ抑制肺癌Lewis细胞转移的免疫学机制。方法：C57BL/6J小鼠尾静脉注射Lewis细胞建立肺癌转移动物模型，将小鼠按随机表法随机分为治疗组和对照组，每组8只，治疗组采用金复康有效组分黄芪甲苷Ⅳ（25 mg/kg）联合重楼皂苷Ⅶ（2.5 mg/kg）进行干预，4周后观察小鼠肺和肝转移情况，H-E染色观察肺和肝转移灶病理组织学变化，流式细胞术检测外周血和脾组织中NK细胞的比例，ELISA法检测血清中TNF-α、IFN-γ水平，免疫组化法检测转移灶组织中Ki-67蛋白的表达水平，免疫荧光法检测转移灶组织中NK细胞的浸润和IFN-γ分泌水平。免疫磁珠法分选健康小鼠脾内的NK细胞，然后与黄芪甲苷Ⅳ（5μmol/L）、重楼皂苷Ⅶ（0.5μmol/L）及两药联合干预后的Lewis细胞共培养，流式细胞术检测NK细胞的脱颗粒水平，LDH法检测共培养后的NK细胞对Lewis细胞的杀伤活性。结果：与对照组相比，经黄芪甲苷Ⅳ联合重楼皂苷Ⅶ干预后的小鼠肺转移和肝转移灶的数目明显减少（均P<0.05），且转移负荷也显著降低（均P<0.05）；转移灶中Ki-67蛋白的表达水平显著降低（P<0.05），转移瘤组织中NK细胞的浸润水平显著增加，且IFN-γ从NK细胞的胞内释放至胞外。此外，模型小鼠脾脏中的NK细胞比例显著降低（P<0.05）而外周血中的NK细胞水平却显著升高（P<0.05），小鼠血清中IFN-γ的水平显著减少而TNF-α的水平却显著升高（均P<0.05）。体外研究发现，黄芪甲苷Ⅳ和重楼皂苷Ⅶ单药或联合干预后，NK细胞的脱颗粒水平显著增加（P<0.05），但并未提高NK细胞杀伤Lewis细胞的活性（P>0.05）。结论：金复康中的有效组分黄芪甲苷Ⅳ联合重楼皂苷Ⅶ可通过促进NK细胞浸润到肿瘤组织内和增强IFN-γ分泌以抑制肺癌Lewis细胞的肺转移和肝转移同，为“正虚伏毒”理论提供了有说服力的实验案例。
- 出版日期2023
- 单位上海中医药大学附属龙华医院; 上海中医药大学; 上海市中医医院
