快速检测牛巴贝斯焦虫LAMP方法的建立

作者：李群; 王素华; 周前进; 蔡渭明; 杜爱芳

来源：中国预防兽医学报, 2010, (10): 781-784.

• 牛巴贝斯焦虫
• 环介导等温扩增技术 Babesia bovis
• loop-mediated isothermal amplification (LAMP)

为提高牛巴贝斯焦虫(Babesia bovis)病检出率,本研究采用环介导等温扩增技术(LAMP)建立一种快速、灵敏、特异的检测B.bovis的方法。根据GenBank中登录的B.bovis细胞色素b基因(cyt b)序列,设计4条LAMP引物,优化反应体系条件,在Bst DNA聚合酶的作用下,62℃反应60min,加入EvaGreen后,肉眼观测。结果表明,该LAMP检测体系特异性强,与双芽巴贝斯焦虫(B.bigemina)DNA等不发生交叉反应;敏感性高,最小检测值为0.014fg(相当于1.58×10-3虫体的拷贝数),为一般PCR方法的1000倍。该方法具有简单、快速、低成本的特点,可...

• 出版日期2010
• 单位温州出入境检验检疫局; 浙江大学