抗新城疫病毒HN蛋白单链抗体的原核表达及其功能鉴定

作者：王斌; 刘培欣; 李涛; 王高玲; 修金生; 胡崇伟; 刘恒贵

来源：中国预防兽医学报, 2014, 36(05): 383-386.

DOI：10.3969/j.issn.1008-0589.2014.05.12

• 单链抗体
• 新城疫病毒
• 血凝素-神经氨酸酶

为制备抗鸡新城疫病毒(NDV)血凝素-神经氨酸酶(HN)单链抗体(scFv)并鉴定其生物学功能,本研究提取抗NDV HN单克隆抗体杂交瘤细胞株总RNA,通过RT-PCR扩增抗HN蛋白抗体的轻链可变区(VL)和重链可变区(VH)编码序列,将其插入含有Linker序列的载体pET-scIG中,构建抗HN的scFv(HN-scFv)原核表达重组质粒pET-HN-scFv并在大肠杆菌中诱导表达。结果显示HN-scFv主要以包涵体形式存在。将包涵体进行复性和Ni-NTA层析柱纯化后用于流式细胞仪检测,结果显示复性纯化后的HN-scFv能够识别表达于293T细胞表面的NDV HN蛋白。该scFv的制备为进一步对该抗体进行改造奠定了基础。

• 出版日期2014
• 单位兽医生物技术国家重点实验室; 动物科技学院; 福建农林大学; 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所