高产纤维素酶绿色木霉基因工程菌的构建

作者：胡耀辉; 闫舟; 于寒松

来源：安徽农业科学, 2010, (25): 13617-13619+13625.

DOI：10.13989/j.cnki.0517-6611.2010.25.045

• 绿色木霉
• CBHⅡ基因
• 瑞氏木霉启动子
• 外源基因表达系统 Trichoderma viride
• CBH Ⅱ gene
• Promoter of Trichoderma reesei
• Heterogeneous genes expression system

[目的]构建CBHⅡ基因过量表达的绿色木霉工程菌。[方法]根据绿色木霉cDNA序列设计合成引物,PCR扩增CBHⅡ基因序列,将完整的目的基因与表达载体pCAMBIA1302连接,转入大肠杆菌DH5α中,获得重组质粒pCAMBIA1302-CBHⅠ。再将pCAM-BIA1302-CBHⅠ重组质粒与瑞氏木霉外切葡聚糖纤维二糖水解酶Ⅱ(CBHⅡ)PcbhⅡ启动子片段连接,将潮霉素磷酸转移酶(hyg)基因片段插入PcbhⅡ启动子下游,转入大肠杆菌DH5α中,获得重组表达质粒pCAMBIA1302-CBHⅡ。[结果]构建的重组表达质粒电转化后经SDS-PAGE电泳检测,绿色木霉纤维素酶CBHII基因在原...

• 出版日期2010
• 单位吉林农业大学