单核细胞增生李斯特菌ncRNA rli60基因缺失株的构建研究

作者：彭叶龙; 乔军; 孟庆玲; 谢堃; 赵海龙; 宋雪梅; 陈创夫

来源：石河子大学学报(自然科学版), 2014, (02): 148-152.

DOI：10.13880/j.cnki.65-1174/n.2014.02.001

• 单核细胞增生李斯特菌
• ncRNA
• rli60基因
• 同源重组
• 重叠延伸PCR Listeria monocytogenes
• ncRNA
• rli60 gene
• homologous recombination
• overlap extension PCR

为了构建单核细胞增生李斯特菌(Listeria monocytogenes,LM)ncRNA rli60基因缺失株,采用基因重叠延伸PCR(SOE-PCR)的方法成功构建具有氯霉素抗性的pKSV7-Δrli60穿梭质粒,然后电转化至LM-SB5感受态细胞中,在温度和氯霉素的双重选择压力下进行同源重组,通过PCR进行重组菌鉴定。结果表明:成功筛选得到遗传性稳定的LM ncRNA rli60基因缺失株,为揭示LM ncRNA rli60基因功能提供了研究材料;同时,为进一步研究其在LM致病性及环境应激中的分子机制奠定了基础。

• 出版日期2014
• 单位石河子大学