IL-2联合IL-15提高肾母细胞瘤患儿外周血NK细胞对肿瘤细胞的杀伤作用

作者：石秦林; 林涛^*; 沈炼桔; 刘丰; 张德迎; 陆鹏; 刘星; 何大维; 李旭良; 魏光辉

来源：中华小儿外科杂志, 2018, 39(05): 345-350.

• 肾母细胞瘤
• 自然杀伤性细胞
• 白细胞介素2
• 白介素15
• 儿童

目的观察肾母细胞瘤(WT)患儿外周血NK细胞经IL-2、IL-15扩增后对肾母细胞瘤SK-NEP-1的杀伤作用。方法以8例WT患儿作为病例组,8例健康体检儿童作为对照组。采集每例外周血4 ml,按Ficoll法分离外周血单个核细胞(PBMC),流式细胞仪检测、分选两组PBMC中CD3-CD16+CD56+NK细胞;另采集病例组和对照组外周血4ml,分离PBMC后,分两组进行培养[IL-2(100 U/ml)培养组、IL-2(100 U/ml)联合IL-15(10 ng/ml)培养组],流式细胞仪检测、分选培养后CD3-CD16+CD56+NK细胞。CCK8法检测在不同效靶比(E:T分别为5:1、10:1、20:1)(效应细胞:NK细胞;靶细胞:SK-NEP-1)情况下,WT患儿外周血NK细胞经IL-2、IL-15、扩增后对SK-NEP-1细胞的杀伤作用。western blot检测培养前、IL-2培养组、IL-2联合IL-15组CD3-、CD16+、CD56+、NK细胞中TNF-α及TNF-β表达情况。结果病例组和对照组采用IL-2联合IL-15扩增后的NK细胞比例分别增加[(7.3±2.4)%比(21.2±3.2)%],[(4.5±1.6)%比(10.1±3.4)%];数量分别增多(70.60±22.5),(30.12±33.16)倍,(P<0.05)。E:T为10:1、20:1时,与单用IL-2扩增比较,IL-2联合IL-15扩增组的NK细胞对肾母细胞瘤细胞的杀伤作用均增强[(16.3±2.1)比(10.5±1.6)]、[(23.9±3.2)比(13.7±2.5)],(P<0.05)。病例组患儿外周血CD3-CD16+CD56+NK细胞采用IL-2联合IL-15培养后TNF-α和TNF-β的表达量,较IL-2组、培养前,均显著增加(P<0.05)。结论 IL-2联合IL-15能够提高患儿外周血NK细胞的比例及数量,增加其分泌TNF的能力,从而提高其对肿瘤的杀伤作用。

• 出版日期2018
• 单位重庆医科大学附属儿童医院