敲低环状RNA WD重复含蛋白1抑制膝骨关节炎软骨细胞增殖并诱导凋亡

作者：申飞燕; 姚吉祥; 苏珊珊; 赵忠民^*; 唐巍东

来源：中国组织工程研究, 2024, 28(04): 499-504.

• circ-BRWD1
• miR-488-3p
• DNMT3A
• 膝骨关节炎
• 软骨细胞
• 增殖
• 凋亡

背景：环状RNA(circular RNA,circRNA)在多种疾病或肿瘤中发挥着重要作用，近年研究结果发现，膝骨关节炎中circRNA失常表达，并可通过调控微小RNA(miRNA)/mRNA参与疾病进展。目的：探究circ-BRWD1/miR-488-3p/DNMT3A对膝骨关节炎软骨细胞增殖和凋亡的影响。方法：实时荧光定量PCR检测膝骨关节炎软骨细胞mi R-488-3p、circ-BRWD1、DNMT3A表达。将细胞分为si-NC组、si-circ-BRWD1组、si-circ-BRWD1+anti-miR-NC组、si-circ-BRWD1+anti-miR-488-3p组、vector组、circ-BRWD1组、miR-NC组、miR-488-3p组、miR-488-3p+vector组、miR-488-3p+DNMT3A组、anti-miR-NC组、anti-miR-488-3p组；实时荧光定量PCR检测circ-BRWD1、miR-488-3p、DNMT3A表达，MTT、流式细胞术检测增殖和凋亡，Western blot检测DNMT3A、增殖、凋亡相关蛋白表达；双荧光素酶报告实验检测circ-BRWD1与miR-488-3p、miR-488-3p与DNMT3A的靶向关系。结果与结论：(1)与正常软骨细胞相比，circ-BRWD1、DNMT3A在膝骨关节炎软骨细胞中高表达，miR-488-3p低表达；(2)敲低circ-BRWD1或过表达miR-488-3p可抑制膝骨关节炎软骨细胞增殖并诱导凋亡；(3)circ-BRWD1靶向负调控miR-488-3p，抑制miR-488-3p可逆转敲低circ-BRWD1对膝骨关节炎软骨细胞增殖、凋亡的影响；(4)miR-488-3p靶向负调控DNMT3A，上调DNMT3A可逆转过表达miR-488-3p对膝骨关节炎软骨细胞增殖、凋亡的影响；(5)circ-BRWD1可通过调控miR-488-3p进而调控DNMT3A的表达；(6)结果表明，敲低circ-BRWD1可抑制膝骨关节炎软骨细胞增殖并诱导凋亡，其作用机制可能与调控miR-488-3p/DNMT3A轴有关。

• 出版日期2024
• 单位泰州市人民医院; 长春中医药大学