单采血小板来源外泌体的提取与鉴定

作者：程福; 杨璐; 李小飞; 陈洁; 杨鑫; 黄远帅^*; 汪德清^*

来源：标记免疫分析与临床, 2019, 26(02): 343-346.

• 单采血小板
• 外泌体提取与鉴定
• 超速离心法

目的研究单采血小板来源外泌体提取和鉴定的常见影响因素,为后续开展单采血小板来源外泌体研究提供参考。方法利用超速离心法分离提取单采血小板来源外泌体,并通过透射电镜、Western Blotting验证提取产物;利用BCA试剂盒测定外泌体总蛋白浓度。结果 5天组外泌体蛋白浓度(1822.2±11. 4μg/mL)明显高于1天组(775. 7±11. 5μg/mL),P <0.001;未冻存组蛋白浓度(1822.2±11.4μg/mL)明显高于不含DMSO冻存组(1153.6±2.6μg/mL)和含5%DMSO冻存组(1403.4±6.1μg/mL),P<0. 001。结论单采血小板来源外泌体含量随标本保存时间延长逐渐增加;冻存处理会一定程度上降低外泌体提取产量和影响其形态观察。

• 单位
  西南医科大学; 中国人民解放军总医院