ALA-PDT通过内质网应激途径诱导瘢痕疙瘩成纤维细胞凋亡的机制

作者：刘雪苹; 朱莉; 曾世华; 熊霞^*

来源：中国皮肤性病学杂志, 2019, 33(03): 258-264.

DOI：10.13735/j.cjdv.1001-7089.201808006

• 光动力疗法
• 成纤维细胞
• 内质网应激
• 细胞凋亡

目的通过内质网应激(endoplasmic reticulum stress, ERS)途径研究5-氨基酮戊酸(aminolevulnilic acid, ALA)联合光动力疗法(photodynamic therapy, PDT)诱导人瘢痕疙瘩成纤维细胞(keloid fibroblasts, KFB)凋亡的机制。方法采用组织块培养法人工培养KFB,经免疫组织化学染色鉴定后,取第3～10代KFB进行干预研究。KFB分为5组,A组:空白对照组(无光敏剂无光照),B组:光敏剂组,C组:光照组,D组:死亡受体和线粒体途径抑制剂+光敏剂+光照组,E组:光敏剂+光照组。ALA 4 mmol/L,PDT 80 J/cm2干预后,CCK-8检测KFB存活率,流式细胞仪检测KFB凋亡率,Western blot检测Caspase-3及ESR途径的标志性蛋白GRP78、PERK和CHOP的表达丰度。结果原代KFB呈长梭形或三角形贴壁成长,波形蛋白免疫鉴定为阳性;CCK8检测及流式细胞仪显示:D、E组KFB活性抑制、凋亡增加;Western blot检测显示:D、E组中Caspase-3以及ESR途径标志性蛋白GRP78、PERK和CHOP较A组的表达均明显上调(P<0.05);D组与E组相比,D组的Caspase-3表达降低(P<0.05),而其中GRP78、PERK、CHOP的表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论 ALA-PDT能够诱导KFB凋亡,且ERS途径可能参与了ALA-PDT诱导KFB凋亡的过程。

• 出版日期2019
• 单位成都市第二人民医院; 西南医科大学