可溶性肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体与5-Fu联用对肝癌细胞的抑制作用

作者：范冬梅; 卢杨; 杨圆圆; 魏忠琴; 林芳珍; 颜次慧; 张砚君; 杨铭; 熊冬生

来源：中国肿瘤, 2017, 26(11): 904-909.

• TRAIL
• 氟尿嘧啶
• 凋亡相关蛋白
• 肝癌

[目的]探讨肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)相关的凋亡诱导配体ILZs TRAIL与5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-Fu)联合应用,对HepG_2肝癌细胞生长的抑制作用。[方法]采用聚合酶链反应(PCR)、酶切、连接等方法构建CMV启动子驱动TNF相关凋亡诱导配体(TRAIL)表达的载体pLenti R.ILZ-s TRAIL及其对照载体pLenti R.CopGFP,经测序验证其正确性。将pLenti R.ILZ-s TRAIL和pLenti R.CopGFP分别转染至293T细胞,48h后收集上清并利用ELISA检测目的蛋白含量。利用CCK8细胞增殖抑制实验、Western blot检测ILZ-s TRAIL与5-Fu联用对HepG_2肝癌细胞生长的抑制作用及凋亡蛋白的表达变化。[结果]成功构建表达载体pLenti R.ILZ-s TRAIL及pLenti R.CopGFP,测序正确。ILZ-s TRAIL的表达量达(9.475±0.786)ng/ml。体外ILZ-s TRAIL与5-Fu联用,可协同抑制HepG_2肝癌细胞的生长。其中凋亡相关蛋白Bcl-2表达降低,Bax表达增加,Caspase-8、9、3及PARP被剪切活化。[结论 ]ILZ-s TRAIL蛋白与5-Fu联合应用对肝癌细胞HepG_2具有抑制作用,为肝癌的治疗提供了一种新策略。

• 出版日期2017
• 单位实验血液学国家重点实验室; 中国医学科学院北京协和医学院