梅山猪胎儿成纤维细胞的分离培养及SRY-PCR法快速性别鉴定

作者:曹海峰; 随刘才; 季索菲; 李运生; 陶勇; 张运海; 章孝荣
来源:安徽农业大学学报, 2011, (06): 907-910.
DOI:10.13610/j.cnki.1672-352x.2011.06.033

摘要

对梅山猪胎儿成纤维细胞的分离培养及性别快速鉴定进行研究,为开展猪体细胞克隆、诱导多能干细胞获取及转基因等提供素材。通过取组织块培养法和胰蛋白酶消化培养法均成功得到梅山猪的胎儿(胎龄35 d)成纤维细胞,取其中7个梅山猪(msz4、msz5、msz6、msz9、msz11、msz14和msz15)胎儿的原代成纤维细胞,在传代培养至第5代时收集贴壁生长的细胞,提取基因组DNA。再利用根据SRY及ZFY/X设计的共2对引物进行PCR反应,扩增后进行琼脂糖凝胶电泳,出现166 bp和445/447 bp两条带的为雄性,只有445/447 bp一条带的为雌性。结果表明梅山猪的细胞系msz6、msz9和m...

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