cdh5-mRNA在野生型斑马鱼胚胎发育过程中的表达模式

作者：吴西军; 姚冬静; 刘庆; 杨小燕; 王念雪; 王一慧; 舒莉萍; 何志旭^*

来源：贵州医科大学学报, 2019, 44(11): 1241-1246.

DOI：10.19367/j.cnki.1000-2707.2019.11.001

• 斑马鱼
• 胚胎发育
• cdh5基因
• 基因表达
• 遗传载体
• 全胚胎原位杂交

目的:探讨cdh5-mRNA在野生型斑马鱼胚胎期发育过程中的表达模式。方法:收取tuebingen野生型斑马鱼多个发育时间节点的胚胎,提取其总RNA,体外逆转录后RT-PCR扩增cdh5基因片段,将cdh5基因片段插入pCS2+质粒载体中,挑选阳性单克隆菌落,通过双酶切、测序等方法鉴定pCS2+-cdh5重组质粒;重组质粒单酶切后用T3RNA体外转录体系制备地高辛标记的cdh5基因的反义mRNA探针,对斑马鱼全胚胎进行原位杂交,显微镜下观察各发育节点胚胎cdh5-mRNA杂交信号并拍照。结果:构建并鉴定了pCS2+-cdh5重组质粒,各发育节点胚胎经全胚胎原位杂交后发现在tuebingen野生型斑马鱼胚胎发育至3.7～12 hpf时cdh5-mRNA呈低丰度泛在表达,18～36 hpf时在后脑及血管处表达、在造血系统高表达,48 hpf后仅在脑部和血管处低表达。结论:在野生型斑马鱼胚胎期发育过程中可以检测到cdh5-mRNA在后脑和血管处有表达,并且在造血组织高表达。

• 出版日期2019
• 单位贵州医科大学; 河北省人民医院