汉坦病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立

作者:胡丹; 郝丽娜; 李丙军; 张锦海; 吕恒; 张凤玉; 龚秀芳; 耿美玲; 谭维国; 操敏; 郑峰; 朱进; 姚苹苹; 张云; 王长军
来源:中国病原生物学杂志, 2014, (04): 347-350+355.
DOI:10.13350/j.cjpb.140415

摘要

目的通过建立汉坦病毒实时荧光定量PCR检测方法,快速准确地检测汉坦病毒。方法根据汉滩型和汉城型汉坦病S片段基因的序列分别设计特异性探针引物,使用含有目的基因片段的重组质粒标准品绘制标准曲线,建立检测两型汉坦病毒的实时荧光定量PCR方法。结果建立的检测方法特异性良好,与其他常见病原不发生交叉反应;最低检测限为101copies/μl,灵敏度高;不同梯度定量模板的拷贝数的对数值与Ct值之间线性关系表达式分别为y=-3.4607x+40.988(HTN),y=-3.5307x+39.356(SEO),扩增效率分别为92.2%(HTN)和92.6%(SEO),相关系数R2分别为0.9968(HTN)和...

  • 出版日期2014
  • 单位中国人民解放军南京军区军事医学研究所; 浙江省疾病预防控制中心

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