H9亚型禽流感病毒基质蛋白M1单克隆抗体的制备与鉴定

作者：戴晓光; 滕巧泱; 黄海碧; 王朝霞; 张树梅; 张旭; 徐大伟; 申之义; 李泽君

来源：中国动物传染病学报, 2010, (03): 8-12.

• H9亚型禽流感病毒
• 基质蛋白M1
• 单克隆抗体
• 间接免疫荧光
• 蛋白免疫印迹法 Avian influenza virus
• matrix protein
• monoclonal antibody
• indirect inmmunofluorescene assay(IFA)
• Western blot

本研究用纯化的H9N2亚型禽流感病毒免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合。对杂交瘤细胞及时筛选,阳性孔经3次有限稀释法克隆,成功获得3株能稳定传代并分泌抗H9亚型禽流感病毒基质蛋白M1单克隆抗体的杂交瘤细胞:3G8、2F6、5F2。间接ELISA方法检测,3株单克隆抗体的腹水间接ELISA效价达106以上。构建了真核表达载体pCAGGS-M1并转染于MDCK细胞,以用于腹水的Western blot和间接免疫荧光鉴定。间接免疫荧光结果表明,3株单克隆抗体皆与真核表达蛋白M1反应。这些单克隆抗体的制备为后期研究M1蛋白在流感病毒复制与出芽过程中的重要生物学功能奠定了基础。

• 出版日期2010
• 单位中国农业科学院上海兽医研究所; 内蒙古农业大学