芩连润肺汤的HPLC指纹图谱建立、含量测定及多元统计分析

作者：闫凯莉; 尹程程; 刘梦瑶; 崔长升; 汪莹; 孙晓舟; 孙丽平; 齐滨; 刘莉^*

来源：中国药房, 2021, 32(16): 1956-1963.

• 芩连润肺汤
• 高效液相色谱法
• 指纹图谱
• 含量测定
• 聚类分析
• 正交偏最小二乘判别法

目的:建立芩连润肺汤的指纹图谱,测定其中11种成分的含量,并进行聚类分析、正交偏最小二乘判别法(OPLS-DA)分析。方法:采用高效液相色谱法(HPLC)。色谱柱为ZORBAX Eclipse Plus C18,流动相为乙腈-0.05%磷酸溶液(梯度洗脱),检测波长为260 nm,柱温为30℃,流速为1.0 m L/min,进样量为10μL。以汉黄芩苷为参照,采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)》绘制10批芩连润肺汤的HPLC指纹图谱并进行相似度评价,确定共有峰;同法测定芩连润肺汤中11种成分的含量;采用SPSS 21.0软件进行聚类分析,采用SIMCA 14.0软件进行有监督模式的OPLS-DA分析,并筛选影响其质量的标志物。结果:10批芩连润肺汤共有21个共有峰,与对照指纹图谱的相似度均大于0.98;共指认了11个共有峰,分别为芦丁、连翘酯苷A、连翘酯苷B、鸢尾苷、野鸢尾苷、黄芩苷、连翘苷、汉黄芩苷、黄芩素、次野鸢尾黄素、汉黄芩素。上述11种成分检测进样量的线性范围分别为9.960 0～49.800 0、1.974 0～9.870 0、0.672 0～3.360 0、0.960 0～4.800 0、0.549 0～2.745 0、5.040 0～25.200 0、1.374 0～6.870 0、0.615 0～3.075 0、0.759 9～3.795 0、0.162 0～0.810 0、0.042 0～0.210 0μg(r均大于0.999);精密度、稳定性(48 h)、重复性试验的RSD均小于2%;平均加样回收率为95.81%～100.29%(RSD为0.43%～1.73%,n=6);含量分别为8.924 4～12.820 8、0.352 2～0.868 7、0.435 6～0.711 2、0.389 8～1.309 0、0.335 8～0.530 1、1.680 5～4.542 3、0.701 8～1.584 2、2.240 2～5.442 5、2.351 0～5.558 9、0.106 0～0.182 2、0.076 8～0.128 9 mg/g。聚类分析结果显示,当类间距为10时,10批样品可聚为两类,S1～S3聚为一类、S4～S10聚为一类;当类间距为5时,第2类又可聚为两类,S6、S7、S9聚为一类,S4、S5、S8、S10聚为一类。OPLS-DA分析结果显示,S6、S7、S9位于得分图的上方,S4、S5、S8、S10位于得分图的左下侧,S1～S3位于得分图的右下侧,与聚类分析结果一致;黄芩苷、鸢尾苷、连翘酯苷A、黄芩素、汉黄芩苷的变量重要性投影值均大于1。结论:所建指纹图谱、含量测定方法的精密度较高、稳定性较好,结合多元统计分析可用于芩连润肺汤的质量控制。黄芩苷等5种成分为影响芩连润肺汤的质量标志物。

• 出版日期2021
• 单位长春中医药大学附属医院; 长春中医药大学