铜完全抗原的合成·鉴定及单克隆抗体的制备

作者:刘文迪; 周玉; 卢士英; 任洪林; 李岩松; 柳増善; 宋芳; 郝亚明
来源:安徽农业科学, 2011, (29): 18072-18074.
DOI:10.13989/j.cnki.0517-6611.2011.29.146

摘要

[目的]获得抗Cu2 的单克隆抗体。[方法]以异硫氰酸苄基乙二胺四乙酸(ITCBE)为双功能螯合剂,使Cu2 分别与载体蛋白牛血清白蛋白(BSA)、卵清蛋白(OVA)偶联,获得免疫原(Cu-ITCBE-BSA)和检测原(Cu-ITCBE-OVA)。用非变性聚丙烯凝胶电泳鉴定偶联结果。免疫Balb/C小鼠,通过细胞融合,获得能稳定分泌抗Cu2 的杂交瘤细胞株,并通过亲和层析法纯化腹水获得抗Cu2 的单克隆抗体。[结果]获得了1株能稳定分泌抗Cu2 的单克隆抗体的细胞株(4A6),所分泌的抗体亚类为IgG1,细胞培养上清效价可达1∶1.0×103,腹水效价可达1∶6.4×105。以该细胞株接种Ba...

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