抗人肝癌组织α-L-岩藻糖苷酶抗体的制备及运用

作者：李超; 林菊生; 钱颉; 周鹤俊

来源：中华肿瘤防治杂志, 2006, (09): 641-644.

• 肝肿瘤,实验性
• 多克隆抗体
• α-L-岩藻糖苷酶

目的:制备和纯化肝癌特异性α-L-岩藻糖苷酶(α-L-fucosidase,AFU)多克隆抗体及初步研究其在肝癌诊断中的临床作用。方法:用自行提取和纯化的人肝癌组织AFU免疫家兔,以间接ELISA检测抗血清效价和工作浓度。抗血清经阴离子交换法纯化后采用Western-blot鉴定纯化的AFU和免疫组化方法定位AFU在肝癌组织中的分布情况。结果:抗血清的效价和工作浓度经间接ELISA检测分别为1∶32000和1∶4000。抗血清经过饱和硫酸铵沉淀,阴离子交换树脂DEAE-52纯化后可在第115收集管前后出现一明显洗脱峰。Western-blot显示纯化的多克隆抗体可特异性地识别相对分子质量为55×103的AFU。免疫组化表明,AFU多表达于肝癌组织的细胞质和(或)胞膜而不表达于癌旁组织。结论:本实验制备的抗人肝癌组织AFU多克隆抗体可用于检测肝癌组织和血清中AFU的表达水平。

• 出版日期2006
• 单位华中科技大学同济医学院附属同济医院