阿魏酸酯酶A的基因克隆与表达及其水解产物的纯化

作者：曾妍; 龚燕燕; 邬敏辰; 殷欣; 唐存多

来源：生物工程学报, 2014, (03): 425-434.

DOI：10.13345/j.cjb.130377

• 米曲霉
• 阿魏酸酯酶A
• 克隆表达
• 阿魏酸
• 纯化 Aspergillus oryzae
• feruloyl esterase A
• gene cloning and expression
• ferulic acid
• purification

为在毕赤酵母中表达来源于米曲霉Aspergillus oryzae的A型阿魏酸酯酶并研究其水解功能,探讨大孔树脂对其水解产物阿魏酸的纯化条件及纯化效果,以米曲霉A.oryzae CICC 40186总RNA为模板,通过RT-PCR技术克隆出了米曲霉阿魏酸酯酶A(AorFaeA)成熟肽的编码基因AorfaeA,并借助pPIC9K质粒实现了其在毕赤酵母GS115中的异源表达。SDS-PAGE分析结果显示纯化后的重组阿魏酸酯酶(reAorFaeA)为单一条带,其表观分子质量约39.0 kDa。以阿魏酸甲酯为底物,经高效液相色谱法测得该酶的最高酶活为58.35 U/mg。利用reAorFaeA和木聚糖...

• 出版日期2014
• 单位江南大学