水稻PDK2基因原核表达和多克隆抗体制备

作者：谭才邓; 李静; 李峰; 庄楚雄

来源：基因组学与应用生物学, 2009, (06): 1039-1042.

• PDK2
• 原核表达
• 多克隆抗体
• 水稻 PDK2
• Prokaryotic expression
• Polyclonal antibody
• Rice

本研究以水稻幼苗为材料,通过RT-PCR扩增得到1.1kb的编码PDK2(登录号:AK100033)基因的片段,成功构建重组表达载体pET-23d-PDK2并转化到大肠杆菌BL21(DE3)中。研究结果表明,重组蛋白以包涵体的形式存在,且PDK2的最佳表达条件为:28℃,120r/min,0.5mmol/L IPTG诱导60min。经纯化后免疫新西兰大白兔以制备PDK2多克隆抗体。Western blot检测表明该抗体的特异性和效价较好,这为进一步研究水稻PDK2的生物学功能奠定了基础。

• 出版日期2009
• 单位广东轻工职业技术学院; 华南农业大学