OX26单克隆抗体耦联的人参皂苷Rg1纳米载药系统促进脑梗死后血管和神经新生的实验研究

作者：沈俊逸; 赵智明; 刘春丽; 壮雨雯; 徐文俊; 蔡辉

来源：医学研究生学报, 2018, 31(04): 398-403.

DOI：10.16571/j.cnki.1008-8199.2018.04.012

• 脑梗死
• 人参皂苷Rg1
• 血脑屏障
• 血管新生

目的血脑屏障能阻止95%以上的药物入脑发挥治疗作用。建立体外血脑屏障模型,观察人参皂苷Rg1纳米载药系统穿透体外血脑屏障的能力,以及其对脑梗死后血管、神经新生的影响。方法建立体外血脑屏障模型,利用Transwell嵌套小室检测PHRO穿越体外血脑屏障模型的能力。10μL PBS(对照组),100μmol/L Rg1(Rg1组)和PHRO(含有100μmol/L Rg1,PHRO组)分别添加到嵌套小室的上室,HPLC检测下室的Rg1含量。利用体外成管模型检测PHRO对血管新生的影响。对照组,Rg1组和PHRO组分别与脑内皮细胞RBE4共同孵育24 h,同时在细胞水平上利用实时荧光定量PCR检测血管新生相关基因VEGFA和Dll4的表达量。利用MTT实验检测PHRO对神经细胞SH5Y增殖的影响。SH5Y细胞分别与对照组,Rg1组和PHRO组共同孵育72 h。利用流式细胞术检测PHRO对缺氧条件下SH5Y细胞凋亡的影响。SH5Y细胞分别与10μL PBS(PBS处理组),1 mmol/L的Na2S2O4(缺氧诱导组),1 mmol/L的Na2S2O4+10μmol/L Rg1(缺氧诱导+Rg1组),1 mmol/L的Na2S2O4+PHRO(缺氧诱导+PHRO组,含有10μmol/L的Rg1)孵育24 h。结果对照组中未检测到Rg1的含量。Rg1组中检测到3.18%的Rg1的含量,PHRO组可检测到28.8%的Rg1含量。对照组内皮细胞成管能力最差,Rg1组内皮细胞的成管能力显著增强(P<0.05)。与Rg1组相比,PHRO组展现出更加明显的成管能力(P<0.05)。与对照相比,Rg1组、PHRO组VEGFA和Dll4的表达量以及SH5Y细胞的增殖显著上调(P<0.01),与Rg1组相比,PHRO组VEGFA和Dll4的表达量以及SH5Y细胞的增殖明显升高(P<0.05)。PBS处理组细胞凋亡数量最少(1.2%),缺氧诱导组的凋亡率最高(21.6%),缺氧诱导+Rg1组细胞凋亡减少(13.14%);而缺氧诱导+PHRO处理组细胞凋亡的数量降低为8.25%。结论 PHRO纳米药物能够穿越体外血脑屏障模型,促进血管、神经细胞增殖,同时能够降低缺氧条件下神经细胞的凋亡,并且促进血管生成相关基因的表达。

• 出版日期2018
• 单位南京军区南京总医院