抗人角蛋白全IgG基因真核表达载体的构建及表达

作者：夏汝山; 王刚; 樊建勇; 李巍; 刘玉峰

来源：细胞与分子免疫学杂志, 2004, (06): 693-695+707.

• 基因工程
• 抗角蛋白全抗体
• CHO(dhfr-)

目的 :构建抗角蛋白抗体基因的真核表达载体 ,并在CHO(dhfr-)细胞中表达。方法 :从含抗角蛋白抗体基因的原核Fab表达载体中 ,扩增VH 及VL 基因。以回收的PCR产物为模板 ,用重叠PCR扩增带有前导序列的VH、VL 基因。经XbaI/BamHI和XhoI/HindIII酶切后 ,分别插入真核表达载体pWD中 ,构建重组载体pWDκH。经PCR和测序鉴定正确后 ,用lipofectAMINE 2 0 0 0转染CHO(dhfr-)细胞。取培养上清检测抗人角蛋白全IgG的表达。结果 :构建了抗人角蛋白基因的真核表达载体pWDκH ,并在CHO(dhfr-)细胞中表达。结论 :在CHO(dhfr-)细胞中成功地表达了具有抗原结合活性的抗人角蛋白IgG ,为其临床应用奠定了基础

• 出版日期2004
• 单位第四军医大学; 西京医院