敲减SET8表达通过上调p53/DRAM1信号通路促进大鼠血管平滑肌细胞自噬和凋亡

作者：刘兰; 张东雪; 朱荣芳; 李晖; 梁向楠; 张胜雷; 白亚玲^*

来源：中国病理生理杂志, 2022, 38(03): 427-433.

• 血管平滑肌细胞
• SET8蛋白
• DRAM1蛋白
• 自噬
• 细胞凋亡

目的：探讨赖氨酸甲基转移酶SET8(SET domain-containing protein 8)低表达通过p53/DRAM1(DNA damage-regulated autophagy modulator 1)通路调控大鼠血管平滑肌细胞（vascular smooth muscle cells,VSMCs）自噬和凋亡的作用及机制。方法：体外原代培养大鼠VSMCs，敲减SET8表达，将细胞分为3组：正常组、空载体对照组和SET8-shRNA组。流式细胞术检测细胞凋亡，MTT法检测细胞活力，Western blot检测SET8、p53、DRAM1、LC3、Bax和Bcl-2的蛋白水平。过表达DRAM1，将大鼠VSMCs分为3组：正常组、空载体对照组和DRAM1组。检测各组细胞活力，凋亡及DRAM1、LC3、Bax和Bcl-2的蛋白水平。敲减SET8表达的同时敲减p53或DRAM1表达，观察LC3、Bax和Bcl-2的蛋白表达情况。结果：（1）敲减SET8表达后，大鼠VSMCs凋亡显著增多，活力显著降低（P<0.05）。Western blot结果显示，敲减SET8表达后，SET8和Bcl-2表达显著降低（P<0.05）,p53、DRAM1、LC3-II和Bax表达显著升高（P<0.05）。（2）过表达DRAM1后，大鼠VSMCs凋亡显著增多（P<0.05），活力显著降低（P<0.05）。Western blot结果显示，过表达DRAM1后，DRAM1、LC3-II和Bax表达显著升高（P<0.05）,Bcl-2表达显著降低（P<0.05）。（3）敲减p53或DRAM1表达后，LC3-II和Bax表达降低，Bcl-2表达升高（P<0.05）。结论：敲减SET8表达可促进大鼠血管平滑肌细胞发生自噬和凋亡，可能机制是通过上调p53和DRAM1表达，促进自噬蛋白LC3-II及凋亡蛋白Bax表达实现的。

• 出版日期2022
• 单位河北医科大学第四医院