单链抗体与lidamycin辅基蛋白融合蛋白工程菌的高密度发酵及其免疫活性

作者：高瑞娟; 赵春燕; 王玉凤; 张秀敏; 赵宝明; 李电东

来源：中国抗生素杂志, 2009, (09): 536-540.

• 单链抗体
• lidamycin辅基蛋白
• 分批发酵
• 补料分批发酵
• 免疫活性 Single-chain Fv antibody
• lidamycin apoprotein
• Batch fermentation
• Fed-batch fermentation
• Immunological activity

目的实现抗Ⅳ型胶原酶单链抗体(Fv)与lidamycin辅基蛋白(LDP)结合构成的融合蛋白Fv-LDP产生菌的高密度发酵,并测定融合蛋白Fv-LDP免疫活性。方法先在5L发酵罐中进行工程菌分批发酵和补料分批发酵,再用固定化金属亲和层析从菌体中纯化融合蛋白Fv-LDP,分步透析使之复性,酶联免疫吸附试验和免疫荧光细胞化学染色检测其免疫活性。结果确定分阶段恒速补料分批发酵为工程菌最佳高密度发酵模式,融合蛋白Fv-LDP最高表达量为4g/L,A600为55左右,培养时间约14h。融合蛋白Fv-LDP对Ⅳ型胶原酶呈阳性免疫反应,能与PG细胞特异结合。结论确定了工程菌高密度发酵工艺,融合蛋白Fv-LD...

• 出版日期2009
• 单位中国医学科学院医药生物技术研究所