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摘要
目的 探讨circFAT1吸附miR-1182调控转化生长因子（TGF）-β/Smad信号通路对胶质母细胞瘤（GBM）增殖、侵袭、上皮-间充质转化（EMT）的调控作用及机制。方法 收集50例GBM样本和5例非瘤脑组织（NBT）样本，随机抽取3例GBM和3例NBT样本进行组织RNA测序。体外培养GBM细胞系U87、U251、T98G、LN229及星形胶质细胞系NHA，通过qRT-PCR检测组织和细胞系中circFAT1表达。通过RNase R选择性降解线性转录本以明确circFAT1成环特性。将GBM细胞分为sh-对照组和sh-circFAT1组，采用慢病毒进行转染。转染后集落形成实验、Transwell实验、Western blot实验分别检测细胞增殖、侵袭及EMT能力。荧光原位杂交（FISH）检测circFAT1在GBM细胞内定位，通过双萤光素酶报告基因和RNA免疫共沉淀（RIP）实验验证circFAT1和miR-1182的相互作用。Western blot实验验证敲低circFAT1后或抑制miR-1182表达对TGF-β/Smad信号通路的调控作用。结果 circFAT1在GBM组织和细胞中表达增加（P<0.05）。RNase R可减少线性FAT1表达（P<0.05），而不影响circFAT1。敲除circFAT1抑制了GBM细胞的增殖、侵袭和EMT(P<0.05)。双萤光素酶报告基因和RIP实验证实circFAT1靶向结合miR-1182。敲低circFAT1后TGFB2、p-SMAD2、p-SMAD3蛋白表达下降，抑制miR-1182表达后GFB2、p-SMAD2、pSMAD3蛋白表达升高。结论 敲除circFAT1可抑制GBM细胞增殖、侵袭和EMT，其作用机制可能与吸附miR-1182调控TGF-β/Smad信号通路有关。
- 出版日期2023
- 单位天津医科大学总医院; 天津市第一中心医院
